Vaccinia Capping Enzyme 牛痘病毒加帽酶10615ES
产品名称: Vaccinia Capping Enzyme 牛痘病毒加帽酶10615ES
英文名称: Vaccinia Capping Enzyme 牛痘病毒加帽酶
产品编号: 10615ES76
产品价格: 0
产品产地: YEASEN
品牌商标: YEASEN
更新时间: 2024-12-10T13:22:33
使用范围: null
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Vaccinia Capping Enzyme
牛痘病毒加帽酶
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
Vaccinia Capping Enzyme牛痘病毒加帽酶 | 10615ES76 | 500 U | 1256.00 |
Vaccinia Capping Enzyme牛痘病毒加帽酶 | 10615ES84 | 2000 U | 3856.00 |
Vaccinia Capping Enzyme牛痘病毒加帽酶 | 10000 U | 14856.00 |
产品描述
真核生物中mRNA经转录后修饰在5端形成一个特殊结构,即帽子结构,该结构对mRNA的稳定、转运与
翻译过程均有较重要作用。牛痘病毒加帽酶是催化形成帽子结构的有效酶,其由D1和D12两个亚基组成,
兼具RNA三***酶活性、鸟苷酰基转移酶活性和鸟嘌呤甲基转移酶活性,可将7-甲基鸟嘌呤帽结构
(m7Gppp)连接到RNA的5末端(m7Gppp5N)。牛痘病毒加帽酶,在合适浓度的加帽缓冲液(Capping
buffer),鸟苷三磷酸(GTP),S-腺苷甲硫氨酸(SAM)等存在条件下,能够在一个小时之内对RNA进
行加帽,并且保证正确的方向。
本品以无菌液体形式提供,可应用于体内/体外翻译前mRNA的加帽反应或mRNA的5末端标记反应。
产品性质
来源(Source) | 携带牛痘病毒加帽酶基因的E. coli |
最适温度(Optimum Temperature) | 37℃ |
储存缓冲液(Storage Buffer) | 20 mM Tris-HCl pH 8.0,100 mM NaCl,1 mM DTT,0.1 mM EDTA,0.1% Triton X-100,50%甘油 |
活性单位定义(Unit Definition) | 37℃条件下,1小时内将10 pmol GTP(α- 32P)掺入到一条含80个核苷酸(80 nt)转录产物上所需要的酶量,即为1个单位。 |
产品组分
组分编号 | 组分名称 | 产品编码/规格 | ||
10615ES76(500 U) | 10615ES84(2000 U) | 10615ES92(10000 U) | ||
10615-A | 10×Capping Buffer | 150 μL | 500 μL | 1.25 mL×2 |
10615-B | Vaccinia Capping Enzyme(10 U/μL) | 50 μL | 200 μL | 1 mL |
运输和保存方法
冰袋运输,-20℃保存,有效期1年。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
2)所提取的RNA需经过纯化并使用无核酸酶的水重悬;
3)在加入酶之前需要对RNA溶液进行加热以去除5末端的二级结构;
4)对于已知5末端结构的RNA,可以延长反应时间至60分钟,提高加帽效率;
5)5末端标记反应体系中,GTP储液应稀释为反应体系中mRNA摩尔浓度的1-3倍。
使用方法
1. 加帽反应(反应体系20 μL)
本步骤适用于10 μg RNA(≥ 100 nt)的加帽反应,且可根据实验需要放大。
1)取10 μg RNA至1.5 mL离心管,使用无核酸酶的水稀释至15 μL;
2)65℃加热5分钟;
3)取出离心管置于冰上5分钟;
4)依次加入以下组分:
组分 | 体积 |
上述变性的RNA | 15 μL |
10×Capping Buffer | 2.0 μL |
GTP(10 mM) | 1.0 μL |
SAM(2 mM) | 1.0 μL |
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