D-萤火虫荧光素,游离酸
产品名称: D-萤火虫荧光素,游离酸
英文名称: D-Luciferin Firefly, Free Acid
产品编号: 40903ES02
产品价格: 0
产品产地: 国产
品牌商标: Yeasen
更新时间: 2024-12-10T13:18:22
使用范围: null
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D-Luciferin Firefly, Free Acid D-萤火虫荧光素,游离酸
产品信息
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
储存 |
价格(元) |
D-Luciferin Firefly, Free Acid D-萤火虫荧光素,游离酸 |
40903ES01 |
100 mg |
-20℃干燥避光保存 |
708.00 |
D-Luciferin Firefly, Free Acid D-萤火虫荧光素,游离酸 |
40903ES02 |
500 mg |
-20℃干燥避光保存 |
2556.00 |
D-Luciferin Firefly, Free Acid D-萤火虫荧光素,游离酸 |
40903ES03 |
1 g |
-20℃干燥避光保存 |
3588.00 |
产品描述
D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,荧光素(底物)能够被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染入细胞后,导入研究动物如大、小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。
D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析、报告基因分析、高通量测序和各种污染检测。目前市场上有三种产品形式,D-荧光素(游离酸),D-荧光素钠盐,以及D-荧光素钾盐。这三种产品主要的差别在于溶解特性上。D-荧光素(游离酸)水溶性以及缓冲体系的溶解性都很弱,除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。钠盐和钾盐形式的D-荧光素能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成液体后的这三种产品,在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。
产品性质
中文别名(Chinese synonym) |
D-萤火虫荧光素游离酸; |
英文别名(English synonym) |
S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid; D-Luciferin Firefly, free acid |
CAS号(CAS NO.) |
2591-17-5 |
分子式(Formula) |
C11H8N2O3S2 |
分子量(Molecular weight) |
280.33 g/mol |
外观(Appearance) |
类白色至浅黄色粉末 |
溶解性(Solubility) |
本品难溶于水,可加入稀碱促进其溶解。 |
纯度(Purity)(HPLC) |
>99% |
运输和保存方法
冰袋运输;-20℃干燥避光保存;有效期一年。
使用方法
1 体外生物发光检测
1)用稀碱(如NaOH,KOH溶液)溶解D-荧光素,游离酸,配制成30 mg/mL的储存液(200×),并调整pH至7.4。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。
【注】:如果有沉淀发生则需要调整pH至更高直至完全溶解。之后可以重新用酸性溶液来中和,调整至pH7.4。
2)用预热好的组织培养基1:200稀释储存液,配制工作液(终浓度150 µg/mL)。
3)去除培养细胞的培养基直至无残留。
4)待图像分析前,向细胞内添加1×荧光素工作液,然后进行图像分析(或者细胞放在37℃短时间孵育后检测可增强信号)。
2 活体成像分析
1)用稀碱(如NaOH,KOH溶液)配制D-荧光素工作液(15 mg/mL),并调节pH至7.4,0.2µm 滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融。一旦使用,放到4℃解冻,保持冰冷且避光。
2)注射量取决于注射方式,具体如下:
注射方式 |
剂量 |
静脉注射(25-27gauge 针头) |
按 10 µL/g 体重浓度,加入相应体积的 15 mg/mL 荧光素工作液 |
腹腔注射(25-27gauge 针头) |
按 10 µL/g 体重浓度,加入相应体积的 15 mg/mL 荧光素工作液 |
肌肉注射(27gauge 针头) |
50 µL,浓度为1-2 mg/mL 荧光素工作液 |
鼻内注射(pipette) |
50 µL,浓度为3 mg/mL 荧光素工作液 |
3)注射入体内10-20 min(待光信号达到最强稳定平台期),再进行成像分析。
【注】:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定最高信号检测时间和信号平台期。
注意事项
1)本品(firefly luciferin)和甲虫荧光素(beetle luciferin)都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-
carboxylic acid,仅仅是不同公司在命名上的差异。
2)本品保存和操作的过程中都要避光。另外储存液过滤除菌后,可以-20℃或-80℃分装冻存,避免反复冻融。如果有条件,对储存液充氮气或氩气(防止氧化),稳定性和保存时间更长,长达1年。
3)注射方式,动物类型以及体重等都会影响信号的发射,因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线,确定最佳信号平台期和最佳的检测时间。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
HB180424