G418(G-418)即G-418 sulfate,也称Geneticin
产品名称: G418(G-418)即G-418 sulfate,也称Geneticin
英文名称: G418
产品编号: 99261ES03
产品价格: 0
产品产地: USA
品牌商标: Yeasen
更新时间: 2024-12-10T11:21:51
使用范围: null
- 联系人 : 李自转
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- 所在区域 : 上海
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产品说明:真核表达筛选用抗生素,可以用于筛选表达特定抗性基因的稳定细胞株。筛选哺乳动物细胞,推荐起始筛选浓度为400微克/毫升;筛选植物细胞,推荐起始筛选浓度为10微克/毫升;筛选酵母,推荐起始浓度为500微克/毫升。根据起始浓度的效果可以再适当升高或降低G-418的使用浓度。
分子式:C20H 40N4O10·2H2SO4
分子量:692.71
CAS#:108321-42-2
外观:白色粉末
溶解性:可溶于水、甲醇、缓冲液和培养基。溶解后,0.22μm过滤除菌,分成小包装,4℃可保存12个月,-20℃保存时间更长。最常用的储存液使用100mM HEPES(pH7.3)配制,浓度为50mg/ml。使用HEPES配制的好处是:加入储存液不会改变培养体系的pH值。
储存条件:2-8℃
G418溶液的配制
配的时候就是用配好的HEPES溶G418,然后过滤,不用高压灭菌了,配好后分装,-20度保存,用的时候取一管放4度。
100mM HEPES(pH7.3)缓冲液(500ml)
ddH2O 490ml
Nacl 4g
Na2HPO4-12H2O 0.1357g
Kcl 0.185g
Glu 0.5g
HEPES 2.5g
用氢氧化钠调PH至7.3 ,定容至500ml
G418贮存液(50mg/ml)的配制
以下为细胞筛选的常用步骤:仅仅作为参考
1.G418的配制:取1g G418溶于1ml 1M的HEPES液中,加蒸馏水至10ml,过滤消毒,4度保存。
2.细胞培养:取待测培养细胞,制备成细胞悬液,按等量接种入多孔培养板中,培养6小时左右开始加药。
3.制备筛选培养基:在100ug/ml~1000ug/ml范围内确定几个梯度,比如先做个100ug/ml、400ug/ml、800ug/ml、1000ug/ml,按梯度浓度用培养基稀释G418制成筛选培养基。
4.加