线性化聚乙烯亚胺PEI转染试剂MW25000(速溶型)-细胞/细菌培养-试剂-生物在线
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线性化聚乙烯亚胺PEI转染试剂MW25000(速溶型)

线性化聚乙烯亚胺PEI转染试剂MW25000(速溶型)

商家询价

产品名称: 线性化聚乙烯亚胺PEI转染试剂MW25000(速溶型)

英文名称: Polyethylenimine Linear(PEI) MW40000(rapid lysis)

产品编号: 40816ES03

产品价格: 925.00

产品产地: 翌圣生物

品牌商标: Yeasen

更新时间: 2024-12-10T11:18:52

使用范围: null

规格 价格
100mg 925.0
1g 3155.0
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产品介绍

 

PEI 40000是一种分子量为40000的高电荷阳离子聚合物,容易结合带负电荷的核酸分子,形成复合物,并使该复合物进入细胞中。PEI 40000是一种瞬时转染试剂,细胞毒性低,转染效率高,在HEK293和CHO等细胞中基因表达效率较高。目前已经验证线性PEI转染试剂广泛适用于多种细胞系包括HEK-293、HEK293T、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3、Sf9、HepG2和Hela细胞等,转染效率高达80%~90%。

PEI 40000与PEI 25000转染试剂相比,具有很多优点。包括:1. PEI 40000较易溶解,可直接在水中溶解,PEI 25000需要先把水调成弱酸性助其溶解,溶解后再用NaOH把pH调至中性;2. PEI 40000操作简便,更易于使用,且比PEI 25000的转染效果好;3. PEI 25000含有4-11%的丙酰基残留,其能阻止聚合物主链与DNA结合。相较于PEI 25000,PEI 40000是完全脱落的结构,因此其性能始终高效如一。

本产品为速溶型,溶解迅速,配制方便。

 

产品信息

 

中文名(Chinese Name)

线性聚乙烯亚胺PEI 40000

英文名(English Name)

Polyethylenimine Linear (PEI) MW40000 

CAS号(CAS No.)

49553-93-7

分子式(Molecular formula)

(CH2CH2NH)n

分子量(Molecular weight)

40,000

外观(Appearance)

白色至灰白色固体

溶解性(Solubility)

溶于水,不溶于有机溶剂:苯,乙醚和丙酮

结构式(Structure)

 

 

运输与保存方法

 

运输方式:室温运输。
保存方式:室温密封保存,有效期2年。储存液在4 ºC保存,有效期3个月。

 

储存液配置(1 mg/mL)

1.材料

PEI 40000、Milli-Q® 水/注射用水(WFI)或类似的生物级水、1 mol/L氢氧化钠(NaOH)、一次性0.1~0.2 μm PES真空无菌过滤器、无菌HDPE或聚丙烯储存瓶。

配置储存液(1 mg/mL)

1)于1 L玻璃烧杯,将1 g PEI 40000粉末加入900 mL Milli-Q®超纯水或其他相当级别的生物用水中,在磁子搅拌器上搅拌均匀。

2)待PEI 40000完全溶解(通常不到5 min)。

3)用氢氧化钠(1 mol/L)溶液调节pH为6.80 - 6.90。

4)将溶液转入量筒内,并加水定容到1 L。

5)用一次性0.1~0.2 µm PES真空过滤器过滤除菌,即得到1 mg/mL的储存液。

6)根据需要分装并储存在4 °C,3个月稳定。

转染操作流程(以6孔板为例)

1.接种细胞:为了提高转染效率,建议在转染前一天接种细胞,以转染时细胞密度在70%~80%为宜。

2.准备DNA-PEI复合物:按照以下体系配制DNA-PEI核酸-转染试剂复合物:

1)对于每孔细胞,使用100 μL无血清培养基稀释2 μg目的DNA,充分混匀成DNA稀释液。

2)立刻向100 μL的DNA稀释液中加入4 μL的PEI 40000转染试剂,轻轻混匀。

3)在室温下孵育10~15 min,使得形成DNA-PEI阳离子核酸转染试剂复合物。

3.转染细胞:

1)在形成复合物过程中,移除细胞生长培养基,每孔中加入2 mL新鲜预热的完全培养基。

2)直接将100 μL DNA-PEI核酸-PEI复合物加入细胞中,摇动培养板,轻轻混匀。

3)37 ℃,5% CO2培养箱培养,转染后最快5 h即可检测到转入基因的表达。请自行确定适合检测时间。

4.稳转筛选(可选)

转染24 h后,将细胞传代至新鲜的生长培养基中(将细胞稀释10倍以上),37 ℃,5% CO2培养箱孵育过夜。第二天加入与转染抗性基因相匹配的筛选药物。约1~2周可筛选到耐药性克隆,在这期间需经常更换含筛选药物的生长培养基。

不同细胞培养容器转染用量(仅供参考):

培养皿

表面积(cm2

DNA的量(μg)

转染试剂的量(μL)

稀释液体积(μL)

培养基总量

96孔板

0.3

0.1

0.1

10

100 μL

48孔板

0.7

0.2

0.3

20

200 μL

24孔板

1.9

0.5

1

50

500 μL

12孔板

3.8

1

2

50

1mL

6孔板

10

2

4

100

2 mL

25cm2培养瓶

21

4

8

200

4 mL

75cm2培养瓶

58

10

20

500

10 mL

【注】:该表使用量仅供参考,具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化。使用时DNA(μg): 试剂(μL)比值保持在1:0.5-1:5


注意事项

 

1)本品为盐酸盐形式的聚乙烯亚胺,具有易结块倾向。

2)对大多数细胞来而言,每1 μg DNA 使用3.0 μL PEI 40000转染试剂都能获得较高转染效率。也可尝试每1 μg DNA使用 0.5~5 μL体积线性PEI 40000转染试剂进行优化。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套及通风橱操作。

4)本产品仅用于科研用途,不可用于人体。

 

Ver.CN240731