猴痘病毒的传播途径主要包括直接接触感染动物的病变渗出物、血液、其它体液，或被感染动物咬伤、抓伤而感染。人与人之间主要通过密切接触传播，但也可以通过飞沫传播，以及接触被病毒污染的物品等方式进行传播。近期有报道指出，猴痘出现了新的变异毒株，这种Ib型变异病毒可以通过分泌物（如呼吸道飞沫）、皮疹或受污染物品等方式进行传播，且青少年儿童是易感人群，需要高度警惕。

近岸蛋白提供猴痘病毒A5L、A29L、A30L、A35R、B6R、E8L、H3L、M1R重组抗原、抗体、酶和试剂解决方案，用于疾病诊断和疫苗药物研发。

一、猴痘病毒抗原抗体和试剂解决方案

部分抗体性能展示

验证方法：乳胶法

抗体配对：DA131包被，DA130标记

验证结果：近岸MPXV A29L抗体对检测A29L抗原（Cat#DRA207）的灵敏度可达100pg/mL。

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二、猴痘病毒核酸检测原料酶及预混液

猴痘是一种由猴痘病毒引起的病毒性人畜共患病，其病原体猴痘病毒是一种有包膜的双链DNA病毒。该病的症状类似于天花，包括发热、头痛、肌肉疼痛、淋巴结肿大和皮疹。猴痘病毒的检测可通过病毒分离培养技术，也可通过电子显微镜观察、痘病毒抗原的免疫组织化学染色、抗正痘病毒IgM和IgG的血清研究进行检测。然而，基于病毒流行病学特点和监测需求，猴痘病毒感染的确诊更适合通过PCR方法特异性地快速检测猴痘病毒DNA。诊断标本直接取自皮疹——皮肤、液体或痂皮等。可在短时间内对痘病毒做出快速、特异性的早期筛查诊断。近岸蛋白针对DNA病原检测提供高性能检测预混液及全套原料酶，并且系列可冻干原料酶、预混液、冻干工艺，支持冻干型核酸检测试剂盒快速开发。

产品性能

快速直扩型qPCR预混液（Cat# E279） NovoStart^® Blood Direct Fast Probe qPCR SuperMix (UDG)

• 快速：能够支持快速程序，即在30min内完成反应；

• 直扩：本品具有很强的抑制物耐受性，可用于抗凝全血、血浆、血清、尿液、咽拭子、唾液等样品的DNA直接扩增检测；

• 方便：PCR反应所必需试剂集于一管之中，数分钟即可完成反应体系配制；

• 防污染：dUTP-UDG系统有效防止PCR产物污染造成的假阳性。 

   

  

三、猴痘病毒RNA疫苗研发产品及服务

RNA技术，凭借其体外快速合成、针对靶点的高度灵活性设计以及不干扰细胞基因组的独特优势，已广泛应用于预防性疫苗和治疗性疫苗开发中，显著缩短了从研发到应用的周期。近岸蛋白拥有成熟的RNA疫苗设计与开发平台，可提供从猴痘抗原筛选、RNA序列设计、模板质粒制备、RNA原液生产、LNP包封到免疫原性评价的全流程服务。

近岸蛋白猴痘RNA疫苗开发相关案例

1 体外候选分子表征

猴痘病毒抗原有两种主要病毒形态：包膜病毒（EV）和成熟病毒（MV）。M1、B6、A35蛋白在病毒的组装和感染等过程起着非常重要的作用。其中A35R蛋白在病毒的结构和功能中具有一定作用，B6R蛋白参与病毒的免疫调节和感染过程，M1蛋白参与病毒粒子的组装。近岸蛋白以猴痘病毒（MPXV）的A35R、B6R、M1R为靶标，通过不同的截短体和连接方式来开发mRNA疫苗。各候选分子在体外均获得良好表达。

Fig. 1 mRNA design and protein expression in transfected 293T cells.

(A) mRNA design. MPXV A35R, B6R and M1R sequences were codon-optimized and inserted into the region between 5’UTR and 3’UTR. m:different truncations or fusions ; &: multivalent mixed samples.

(B-D) protein expression measured by western blotting. The four mRNAs (1-4) were mixed separately, then was mass-equally transfected into 293T cells . Cell lysates were loaded into SDS-PAGE gels for western blot analysis after 24 hours of transfection. B: anti-A35R antibody incubation; C: anti-B6R antibody incubation; D: anti-M1R antibody incubation. M: protein marker; group number; m: mRNA; L: LNP

2 动物实验结果展示

利用ELISA检测小鼠血清对MPXV抗原(A35R、B6R和M1R)的结合抗体反应。结果表明，在所有接种小鼠血清中均检测到针对所有三种靶抗原的抗体，且抗体滴度随着免疫次数的增加而显著增加，不同组别抗体水平相当。初步评估结果表明近岸蛋白所构建的多组别分子有潜力开发成为新一代猴痘mRNA疫苗。

Fig. 2 Humoral Immune Response in mRNA-LNP (1-4)Vaccinated Mice.

(A) Schematic diagram of immunization, sample collection.Female BALB/c mice were intramuscular immunized with 10 μg mRNA-LNP vaccine on day 0 and day 14 (n = 4). Mice vaccinated with buffer were used as negative control. Serum was collected 0 day(before the initial vaccination), 14 and 28 days after the initial vaccination.

(B-D) The MPXV-specific antigen A35R, B6R and M1R IgG antibody titer was determined by ELISA. ("*" indicates comparison with the control Buffer of the same time period, and the horizontal line indicates pairwise comparisons. *p < 0.05; **p < 0.01)

近岸蛋白已储备性开发多类型疫苗创新型候选分子，重点布局RNA疫苗、重组亚单位、类病毒粒子（VLP），致力于为下游疫苗企业客户加快疫苗开发速度、快速进入申报阶段。

综上，近岸蛋白提供猴痘病毒优质重组抗原、抗体、酶及试剂等产品和疫苗研发全流程解决方案，用于疾病诊断和疫苗药物研发，欢迎申请试用。电话：400-600-0940。